黃大茶降血糖化合物的探究
糖尿病是一種以餐后持續(xù)高血糖為特征的慢性代謝性疾病,可引起高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、心血管疾病和腎功能衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥,主要特征有血糖升高和胰島素抗藥性,餐后碳水化合物的水解是血糖的主要來源,因此有必要抑制餐后碳水化合物的快速水解,以防止體內(nèi)葡萄糖水平過高。 α-葡萄糖苷酶是一類水解酶,可以促進(jìn)葡萄糖苷鍵的斷裂,釋放出葡萄糖從而使血糖升高,被認(rèn)為是潛在的糖尿病靶標(biāo),抑制該酶的活性會(huì)延緩糖類物質(zhì)的消化和分解,從而降低葡萄糖進(jìn)入血液的速率,達(dá)到有效緩解和治療糖尿病目的。
黃大茶產(chǎn)自安徽省六安市霍山縣,是一種經(jīng)過高火烘焙的黃茶,其“拉老火”工藝是黃大茶最為特殊和重要的一道工序,高溫烘焙不僅賦予黃大茶獨(dú)特的香氣和滋味,還顯著提升了其降糖的生物活性。安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶葉國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究結(jié)果表明,黃大茶相比其它茶類能夠顯著降低小鼠的血糖水平,且經(jīng)過拉老火后的黃大茶的 α-葡萄糖苷酶抑制效果顯著提升,但其中關(guān)鍵活性化合物尚不明確。
為了探究黃大茶中的重要降糖活性化合物, 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)吳悠、宛曉春教授*和張梁教授*等采用溶劑萃取、色譜分離和分析化學(xué)技術(shù)對(duì)黃大茶及其不同溶劑萃取部位進(jìn)行研究,以糖類水解酶活性抑制率進(jìn)一步追蹤黃大茶中關(guān)鍵降糖活性化合物,隨后通過波譜學(xué)解析關(guān)鍵化合物的結(jié)構(gòu),最后采用液相制備分離的方法對(duì)比每種化合物的生物活性,篩選出其中具有較高 α-葡萄糖苷酶抑制活性化合物。
活性組分檢測(cè)及其作用機(jī)理探究
體外α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,黃大茶茶湯的乙酸乙酯萃取部位的酶活抑制能力最佳,隨后對(duì)該部位進(jìn)行了熒光猝滅效應(yīng)檢測(cè),證實(shí)了乙酸乙酯層化合物能夠使α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶上的發(fā)色基團(tuán)猝滅,蛋白(α-葡萄糖苷酶)互作實(shí)驗(yàn)表明其中的化合物可以靜態(tài)結(jié)合與動(dòng)態(tài)碰撞的方式抑制酶的活性,隨后的分子模擬實(shí)驗(yàn)結(jié)果也驗(yàn)證了蛋白互作實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
關(guān)鍵化合物篩選
為快速篩選乙酸乙酯層中關(guān)鍵的酶活抑制化合物,使用LC-Q-TOF-MS/MS鑒定出了其中31 個(gè)主要化合物,并用液相制備分離,分別檢測(cè)其 α-葡萄糖苷酶活性抑制能力,結(jié)果表明N-乙基-2-吡咯烷酮取代的黃烷-3-醇類物質(zhì)具有較強(qiáng)的酶活抑制率的特點(diǎn),因此初步判定該類化合物為黃大茶中抑制 α-葡萄糖苷酶的活性化合物。
黃大茶的5 種溶劑萃取部位中,乙酸乙酯部位對(duì) α-葡萄糖苷酶抑制活性最高;熒光檢測(cè)結(jié)果和蛋白互作篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明活性化合物可以通過靜態(tài)結(jié)合與動(dòng)態(tài)碰撞兩種方式抑制酶活并使發(fā)色基團(tuán)失活且分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了該部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果;對(duì)活性部位的化合物分別進(jìn)行鑒定和酶活抑制率的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)EPSFs類化合物含量很低卻具有較高的 α-葡萄糖苷酶活性抑制率,初步認(rèn)定為黃大茶中具有關(guān)鍵降糖活性的化合物。
(第一作者:吳悠 通信作者:宛曉春 張梁)
來源: 食品科學(xué)雜志
本文標(biāo)題:黃大茶降血糖化合物的探究 - 黃茶_黃茶知識(shí)_黃茶的種類_黃茶的功效與作用
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